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穩(wěn)定細胞株篩選
簡要描述:
穩(wěn)定細胞株篩選通過慢病毒感染配合藥物篩選的方法獲得穩(wěn)定表達Oct-4-EGFP的LELA穩(wěn)定細胞株
更新時間:2026-03-20
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廠商性質(zhì):其他
穩(wěn)定細胞株篩選
穩(wěn)定細胞株篩選實驗原理外源基因在細胞中的表達可分為兩大類,一類是瞬時表達,一類是穩(wěn)定表達(又叫長久表達)。前者外源DNA/RNA不整合到宿主染色體中,雖然可以達到高水平的表達,但通常只持續(xù)幾天。后者外源DNA整合到宿主細胞染色體上,使宿主細胞可長期表達目的基因。建立穩(wěn)定細胞株,一般是根據(jù)不同基因載體中所含有的抗性標(biāo)志選用相應(yīng)的**對靶細胞進行篩選。常用的抗性標(biāo)記基因有潮霉素(hygromycin)、新m素(neomycin)和嘌呤霉素(puromycin)。
實驗流程1、載體構(gòu)建(表達質(zhì)粒載體、病毒載體);2、轉(zhuǎn)染/感染;3、目的蛋白初步檢測;4、***篩選;5、目的蛋白再次檢測(定性/半定量);6、單克隆細胞株穩(wěn)定性檢測。四、 客戶提供培養(yǎng)好的細胞五、 公司提供:基本實驗步驟、圖片、數(shù)據(jù)分析結(jié)果和穩(wěn)定表達細胞株實驗周期:大約3-4月左右,具體需要根據(jù)細胞實驗內(nèi)容而定。
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